熒光定量PCR儀以參照物為標(biāo)準(zhǔn)，對PCR終產(chǎn)物進(jìn)行分析或?qū)CR過程進(jìn)行監(jiān)測，從而達(dá)到評估樣本中靶基因的拷貝數(shù)，稱為定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR擴(kuò)增的指數(shù)期進(jìn)行的。
　　PCR是對原始待測模板核酸的一個擴(kuò)增過程，任何干擾PCR指數(shù)擴(kuò)增的因素都會影響擴(kuò)增產(chǎn)物的量，使得PCR擴(kuò)增終產(chǎn)物的數(shù)量與原始模板數(shù)量之間沒有一個固定的比例關(guān)系，通過檢測擴(kuò)增終產(chǎn)物很難對原始模板進(jìn)行準(zhǔn)確定量。近年來研究人員通過大量的實(shí)踐，研究了相對準(zhǔn)確的定量PCR方法，即熒光定量PCR儀的熒光定量PCR。
　　PCR擴(kuò)增通式：
　　1.Tn=T0（1+E）n；
　　2.Tn=Tn-1（1+E）n。
　　注：其中E表示擴(kuò)增效率，n為循環(huán)數(shù)，Tn表示在n個周期后PCR產(chǎn)物的數(shù)量，Tn-1表示在n-1個周期后PCR產(chǎn)物的數(shù)量，T0為原始模板數(shù)量。設(shè)定PCR到達(dá)指數(shù)擴(kuò)增期時，產(chǎn)生一定的熒光高于背景為儀器所識別，此時的循環(huán)數(shù)為CP,也就是K=T0（1+E）CP，取對數(shù)即：
　　lg K=lg T0+CP*lg(1+E)；
　　CP=-1/lg(1+E)*lg T0+lgk/lg(1+E)。
　　由于對一特定的PCR而言，E與K均為常數(shù)，故上式為循環(huán)數(shù)（CP）對原始模板拷貝數(shù)的對數(shù)（lg T0）一次方程，其標(biāo)準(zhǔn)形式y(tǒng)=kx+b,該直線的斜率為-1/lg(1+E)，在橫坐標(biāo)上的截距為lgk/lg(1+E)，也是熒光定量PCR儀所謂的標(biāo)準(zhǔn)曲線。